封闭（blocking）是在抗原或抗体包被之后，使用高浓度的无关蛋白质溶液进行的过程。抗原或抗体的包被通常使用较低浓度，这样固相载体的表面会留有未被占据的空隙。封闭的目的是通过填充这些空隙，使用不相关的蛋白质，从而排除在ELISA试剂盒后续步骤中可能出现的干扰物质。通常，在免疫学实验中，会使用封闭剂来减少非特异性结合，以确保实验的准确性。

常见的封闭剂包括脱脂奶粉、BSA（牛血清白蛋白）、动物血清以及Fab片段单链二抗。根据不同的实验平台，选择合适的封闭剂至关重要。

1. 脱脂奶粉

脱脂奶粉的作用原理是利用其中多种蛋白质封闭未被吸附的固相载体（如 WB膜、ELISA板等）位点，降低抗体与之结合的概率，从而避免因非特异性结合造成的高背景。优点是价格便宜，且因含有多种不同分子量的蛋白，封闭效果更为全面。但它的成分复杂，适用范围较窄，不适用于生物素和碱性磷酸酶标记的抗体系统，并且封闭后的载体不易长期保存，因此在试剂盒的生产中应用较少。

2. 牛血清白蛋白（BSA）

BSA的作用原理与脱脂奶粉相似，也是通过封闭未吸附的固相载体位点。其优点在于成分单一，适用于ELISA和对特异性要求较高的免疫学实验。缺点则在于BSA中可能含有少量抗体残留，从而引发抗原和抗体之间的交叉反应。

3. 动物血清

动物血清的封闭作用主要体现在两方面：第一，通过封闭待检样本中与蛋白质非特异性结合的物质，降低高背景的可能性；第二，因样本中可能存在Fc受体，而血清中有抗体，能够有效地封闭一抗及二抗与样本Fc受体的结合。优点是能有效减少抗体间的非特异性结合，广泛应用于免疫组化和免疫荧光实验。缺点是某些封闭血清中可能含有叠氮钠，因而不适用于HRP酶标的检测体系。

4. Fab片段单链二抗

Fab片段单链二抗由于其只有一个结合位点，能够完全封闭免疫球蛋白，因此常用于IHC或IF双标/多标实验，解决来自同一物种一抗的困扰。

5. 无蛋白封闭剂——新型高效封闭剂Blocker

该无蛋白封闭剂通过化学合成达到高亲水性，避免了生物封闭剂可能存在的生物安全性、质量和批间差等问题。主要特点包括与微球表面的羧基形成稳定的共价键，批间差小，纯度高，并有效减少非特异性吸附，提升试剂的灵敏度和稳定性。可广泛应用于乳胶免疫比浊和化学发光试剂，作为BSA的替代或联用，充分展现了尊龙凯时的优势。

6. 免疫试剂稳定液

免疫试剂稳定液主要用于免疫分析检测试剂、抗原、抗体及蛋白的保存。该稳定液为即用型，无需稀释，使用方便。将待保存物质溶于稳定液中后置于冰箱，即可维持蛋白的三维结构和生物活性，延长免疫分析试剂及蛋白的使用期限，确保产品性能。应用领域包括免疫比浊及化学发光检测试剂保存，以及抗原、抗体和酶类的长期保存，体现了尊龙凯时的专业性。